什么是膠質(zhì)瘤?
很多人對(duì)腦膠質(zhì)瘤不太了解,只知道它是一種腫瘤。其實(shí)腦膠質(zhì)瘤是屬于腦腫瘤的一種,但是它的發(fā)病率非常的高。據(jù)資料顯示,患此病的男性多于女性。臨床上把腦膠質(zhì)瘤分為四個(gè)級(jí)別:Ⅰ級(jí)是良性膠質(zhì)瘤,Ⅱ級(jí)是惡性度較低的膠質(zhì)瘤,Ⅲ-Ⅳ級(jí)是高度惡性的膠質(zhì)瘤。然而,臨床上超一半的患者屬于Ⅳ級(jí)。膠質(zhì)瘤是大腦和脊髓膠質(zhì)細(xì)胞癌變所產(chǎn)生的、最常見的原發(fā)性顱腦腫瘤,亦可以稱為神經(jīng)外胚層腫瘤,或又名神經(jīng)上皮腫瘤。起源于神經(jīng)膠質(zhì)、室管膜、脈絡(luò)叢上皮、神經(jīng)元等,占顱內(nèi)腫瘤40%,病因至今未明。
目前雖采取積極地手術(shù)治療,輔以化療、放療和生物治療等,但療效不佳,病死率極高,因此迫切需要深入研究其生物學(xué)特性,開展新的、有效的輔助治療。在這些研究中,建立相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型是治療和研究膠質(zhì)瘤的關(guān)鍵。
裸鼠皮下膠質(zhì)瘤模型構(gòu)建方法
根據(jù)腫瘤接種部位的不同,接種方法可分為皮下注射及原位注射等模型,而鑒于原位荷瘤會(huì)導(dǎo)致血腦屏障的破裂和反應(yīng)性腦內(nèi)傷口的形成還需要精細(xì)的操作和儀器,我們選用皮下注射成瘤。先取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞,經(jīng)胰蛋白酶消化、離心等處理后,計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù),調(diào)整到所需細(xì)胞濃度,用注射器抽取混勻的細(xì)胞懸液,接種于裸鼠右側(cè)背部靠右后肢皮下處,建立裸鼠皮下膠質(zhì)瘤模型。接種后每日觀察裸鼠精神、飲食、排便及活動(dòng)情況,每隔3 天稱質(zhì)量并用游標(biāo)卡尺測量并計(jì)算移植瘤平均體積,求其平均值并繪制腫瘤生長變化曲線,觀察神經(jīng)膠質(zhì)瘤的生長情況。接種第36天處死裸鼠取出腫瘤,肉眼觀察移植瘤形態(tài)、質(zhì)地、活動(dòng)度。用福爾馬林固定腫瘤組織,包埋,脫蠟,染色,觀察病理性特征。
圖A將荷瘤的鼠腫瘤切片進(jìn)行HE染色處理,荷瘤部位染色加深,(圖中黑方框圈中的部位),正常組織染色較淺
圖B 接種第36天裸鼠膠質(zhì)瘤組織,肉眼可見腫瘤組織呈結(jié)節(jié)狀、灰白色,大小形態(tài)不規(guī)則,與周圍皮膚不粘連
影響裸鼠成瘤的關(guān)鍵因素
1.腫瘤細(xì)胞狀態(tài)
首先要考慮移植的腫瘤細(xì)胞是否能成瘤,其次是細(xì)胞接種數(shù)量,一般不超過1×107;不同細(xì)胞株,劑量不一樣,一般是惡化程度越高的,接種數(shù)量可適當(dāng)減少。
2.裸鼠周齡
裸鼠周齡不要小于四周,否則動(dòng)物耐受度大大降低,容易死亡;也不能周齡太大,否則免疫力會(huì)增強(qiáng),不易形成腫瘤;
3.種植部位
一般選擇血供豐富區(qū)域,如左側(cè)前肢,血供豐富,容易生長新血管。
膠質(zhì)瘤的動(dòng)物模型對(duì)腫瘤個(gè)性化治療和藥物篩選,具有重大的意義,同時(shí)也是研究腫瘤的新途徑。歡迎大家關(guān)注拓普生物公眾號(hào),帶您了解最新動(dòng)物模型資訊。
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