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了解神經病理性疼痛,從坐骨神經損傷(CCI)動物模型開始!

發布時間:2024-04-19
神經病理性疼痛是由神經系統損傷或異常的一種難以治療的疼痛狀態,坐骨神經慢性壓迫損傷模型(CCI)是研究神經病理性疼痛最常見的動物模型,為進一步研究神經損傷修復的機制及策略提供基礎。

神經病理性疼痛是由神經系統損傷或異常的一種難以治療的疼痛狀態,坐骨神經慢性壓迫損傷模型(chronic constriction injury of the sciatic nerve,CCI)是研究神經病理性疼痛最常見的動物模型,為進一步研究神經損傷修復的機制及策略提供基礎。

 

下面我們就來看看坐骨神經慢性壓迫損傷模型的具體建立:

 

01:術前準備

實驗動物:健康SD大鼠,6~8周齡,雄性,體重180~250g;
實驗器材:4-0縫線、縫合針、彎鑷2把、眼科剪1把、止血鉗1把、5ml注射器、自制輔助固定鉤2支、棉球、棉簽、電動剃毛器等;
實驗試劑:4%水合氯醛、碘伏、醫用酒精、生理鹽水;

02:實驗方法

1)根據動物體重,將4%水合氯醛,按照0.5ml/100g的劑量進行腹腔注射,以將動物麻醉,后用剃毛器剃去左后肢大腿外側至股骨區域的毛發;
2)將動物以俯臥位固定四肢于手術板上,用酒精棉球對手術區皮膚進行消毒處理,然后剪開左側大腿皮膚約1.5cm
3)用止血鉗順肌紋鈍性分離股二頭肌暴露出坐骨神經。再用固定鉤稍微撐開肌肉,暴露出手術視野,在坐骨神經三叉分支前的主干部位游離神經7mm左右,用鑷子輕柔分離出坐骨神經;
4)在距離三叉分支前2mm處,用4—0縫合線結扎坐骨神經4道,每道間距1mm,使被結扎的神經長約4~5mm。結扎的松緊程度以打結時可見小腿肌肉或腳趾輕微抽動為準;
5)用生理鹽水或PBS將手術區域沖洗干凈,依次縫合肌肉、皮下組織及皮膚,清洗傷口并用碘伏消毒。

 

03:模型動物鑒定

1)行為學觀察

在術后兩周內,每隔1~2天觀察大鼠的步態和左后肢的姿勢、后肢是否有蜷縮、是否存在舔咬四肢等。
較成功的模型術后1~2周內,下肢行走無力,左側足趾并攏輕度外翻,經常懸空不敢著地;站立時以右后肢持重,左后肢抬起并緊貼腹部;術后14天左右,左后肢出現比較明顯的肌肉萎縮。

 

2)Western Blotting檢測GCH1表達程度

分別于手術3、7、14、28天,取大鼠手術側L4~L6背根神經節(DRG),Western Blotting檢測與疼痛相關基因三磷酸環化水解酶1(GCH1)的表達變化。與正常大鼠相比,CCI大鼠GCH1的表達水平明顯更高,且呈現先升高后降低的趨勢。

該模型操作簡單,易掌握,術后第2天開始便出現疼痛反應,10~14天達到高峰,持續2個月后疼痛反應消失。