大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型
動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是一種慢性動(dòng)脈疾病,可引起冠心病和腦梗死等,是嚴(yán)重危害人類健康的常見病,在發(fā)達(dá)國(guó)家動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病被稱為“頭號(hào)殺手”。動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型的建立是研究和控制該疾病的必要手段,因此建立一種脂質(zhì)代謝和斑塊與人類相似的實(shí)驗(yàn)性動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型具有重要的意義。
幾種常見造模方法
1.1 喂養(yǎng)法建立AS模型
1)單純高脂飼料制備AS模型
動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生是血漿中脂質(zhì)沉積在動(dòng)脈內(nèi)膜并刺激結(jié)締組織增生的結(jié)果,因此在建立AS模型之前,首先是建立一個(gè)高脂血癥模型,而大多數(shù)AS模型是建立在高脂飲食基礎(chǔ)上的(SD大鼠用D12109c高脂飼料喂養(yǎng),對(duì)照組用d12102c飼料喂養(yǎng)),通常喂養(yǎng)10周后再冠狀動(dòng)脈出現(xiàn)粥樣硬化板塊。
高脂飼料建立AS模型的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單,成本低廉,易飼養(yǎng),所以目前仍是研究AS動(dòng)物模型的常用方法,但弊端是喂養(yǎng)周期長(zhǎng),病變不穩(wěn)定。
2)高脂飼料加維生素D制備AS模型
由于大鼠無膽囊,對(duì)膽固醇等脂質(zhì)吸收少,單純的高脂飼料只能產(chǎn)生脂質(zhì)沉積,很難誘導(dǎo)大鼠AS的形成,因此高脂飼料聯(lián)合一些可以加速AS形成的藥物共同作用,可提高制備效率。研究表明,動(dòng)脈粥樣硬化的血管壁中含有大量的鈣,其含量與冠心病的病變程度呈正相關(guān),因此過量的維生素D可加速AS的形成。
通常可采用高脂飼料喂養(yǎng)加腹腔注射VD,7周后可成功復(fù)制大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型;也可以通過高脂飼料喂養(yǎng)加肌注注射VD和尼guding灌胃(nigu丁可造成內(nèi)膜的損傷,內(nèi)彈力板的斷裂),4周后有明顯的動(dòng)脈粥樣斑塊形成。
該法簡(jiǎn)單易行,成本低廉,克服了單純高脂飼料喂養(yǎng)法復(fù)制AS模型中穩(wěn)定性差及周期長(zhǎng)的缺點(diǎn),且操作簡(jiǎn)單,便于大面積推廣。
1.2 機(jī)械損傷法制備AS模型
研究人員在飼料致血脂紊亂的基礎(chǔ)上加手術(shù)直接作用,制備AS模型。
球囊損傷術(shù)制備AS模型
球囊損傷術(shù)主要造成內(nèi)皮細(xì)胞的即刻剝脫,彈力版及中膜損傷。將充滿生理鹽水的塑料球囊導(dǎo)管放入頸總動(dòng)脈(也可以在腹主動(dòng)脈或髂動(dòng)脈),來回拉動(dòng)3次,再加以高脂飼料,28天后出現(xiàn)明顯的動(dòng)脈硬化病變。此法可造成嚴(yán)重的內(nèi)彈力板和中膜損傷,所以造模過程中要注意球囊和血管直徑的比例,且操作時(shí)應(yīng)輕柔,以免造成其他血管的損傷。
移植法制備AS模型
器官移植導(dǎo)致的動(dòng)脈粥樣硬化是器官移植患者長(zhǎng)期生存的主要瓶頸,它的組織學(xué)變化源自慢性排斥反應(yīng)。將SD大鼠的腹主動(dòng)脈冷缺血原位腹主動(dòng)脈移植,術(shù)后10周見內(nèi)膜明顯增厚,由此可見行腹主動(dòng)脈移植,強(qiáng)化冷缺血損傷,造成移植物動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。
2.AS模型的鑒定方法
2.1體重變化:
研究表明,SD大鼠對(duì)照組喂養(yǎng)前體重約180g左右,喂養(yǎng)后體重增長(zhǎng)至220g左右;AS模型組喂養(yǎng)前體重約180g左右,喂養(yǎng)后體重增長(zhǎng)至500g左右,差異顯著。
2.2血清生化(血脂4項(xiàng))
采集對(duì)照組和模型組全血并分離血清,用小動(dòng)物生化儀檢測(cè)總膽固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白(HDL-C),低密度脂蛋白(LDL-C),結(jié)果顯示TC、TG和LDL-C明顯有差異。
2.3.動(dòng)脈血管大體油紅O染色
取SD大鼠頸總動(dòng)脈(冠狀動(dòng)脈或腹主動(dòng)脈等),做大體油紅O染色,可見明顯動(dòng)脈硬化斑塊。
3.參考文獻(xiàn)
【1】趙娟,李相軍,孫波,等.維生素D聯(lián)合高脂飼料建立大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型。.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2009,25(21):3569-3571.
【2】楊曉玲,趙迅霞,王菲,等.實(shí)驗(yàn)大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立。寧夏醫(yī)學(xué)院,2007,29(4):879-882.
【3】李迎新,黃霖.動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型制作方法的介紹。中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志,2008,18(5):70-73.
【4】王園園,龍民慧,鄒民吉,等.大鼠動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的建立和評(píng)價(jià)。中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,2008,16(6):764-766.
【5】王麗岳,曾秋棠,龔凡,等.阿托伐他汀調(diào)節(jié)血管球襄損傷術(shù)后核受體Nur77的表達(dá)。臨床心血管病雜志,2010,26 (7):540-544.
【6】陳衛(wèi)國(guó),李幼平,盧一平,等.大鼠移植動(dòng)脈硬化加快模型的建立。中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2003,20(7):663-665.
【7】 閆盛,郝斌.動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型研究現(xiàn)狀。山西醫(yī)藥雜志,2008,37(8):731-733.