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中大型實驗動物心梗模型!不同種!手術方法與模型特點齊分享!

發布時間:2024-04-19
研究心肌梗死的重要方法是建立動物心肌缺血及心肌梗死模型

心肌梗死(myocardial infarction)是冠狀動脈閉塞,血流中斷,使部分心肌因嚴重的持久性缺血而發生局部壞死。臨床表現呈突發性,劇烈而持久的胸骨后疼痛,特征性心電圖動態衍變及血清酶的增高,可發生心律失常、心力衰竭、休克等合并癥,常可危及生命。本病在歐美最常見,在美國每年約有150萬人發生心肌梗死。中國在世界上屬低發區,但近年來也有上升趨勢。因此,對于缺血性心肌梗死的研究再國內日益受到重視。
研究心肌梗死的重要方法是建立動物心肌缺血及心肌梗死模型。急性心肌梗死動物模型研究經歷了漫長的探索過程。從1943年成功建立了急性心肌梗死動物模型之后,國內外相繼有大量開胸結扎冠脈法復制心肌梗死動物模型成功的報道,應用的動物包括小鼠、大鼠、家兔、犬、豬、猴和羊等。由于成本和容易獲得,早期很多心肌梗死實驗應用小鼠和大鼠來完成,如今研究日漸深入,越來越多實驗開始使用更加接近人類真實體型和解剖結構的實驗動物來進一步研究心肌梗死。

  • 小型豬冠脈結扎法

1手術方式
小型豬經一夜空腹后,全身麻醉,右側臥位固定于手術臺上,氣管插管后機械通氣。常規消毒鋪巾,手術從胸壁左側第四肋間切口(指腹觸及心臟搏動最強處)進胸,逐層打開皮膚、皮下組織和肌層。胸廓撐開器撐開胸腔,暴露心包,從左心耳部打開心包腔約5cm,暴露心臟。用5%利多卡因噴灑在心臟表面以降低心臟對手術操作刺激的反應。向上翻起左心耳,沿左心耳根部順LAD走行方向找到LAD第二對角支起始部,剪開心外膜小心游離LAD血管約1.5~2.0cm,以兩根絲線牽引血管,提起后迅速使用冠脈阻斷帶,用力夾閉阻斷帶,待心臟左心室前壁逐漸變為暗紅色、運動幅度降低后,結扎LAD,心電圖出現ST段呈弓背向上型抬高以確定心肌梗死(myocardial infarction, MI)模型成功仔細檢查心包腔,確定無活動出血后,沖洗心包腔,間斷縫合心包,逐層關閉縫合胸壁,排氣關胸。待動物清醒后肌注哌ti啶0.5ml、安定1ml止痛。繼續觀察3小時,動物能站立后送回飼養籠。術后1天拔除引流條,術后3天內每天肌注青霉素鈉160萬U預防感染。

2.模型特點
(1)模型制作由于開胸手術而破壞左側胸膜腔,雖然術中有呼吸機輔助呼吸,但術后動物的肺功能仍不可避免的受到影響,此外,開胸手術造成肋骨移位,也會影響胸腔呼吸運動。因此,如果需要進行呼吸功能相關的研究,不宜選用該模型。
(2)由于開胸手術給動物帶來較大的創傷,涉及炎癥反應、細胞因子和心肌酶學等相關指標的研究將受到干擾。
(3)結扎冠脈制作的心肌梗死模型模擬了急性心肌梗死過程,適于研究急性心梗后的病理反應過程、藥效和搶救措施等,不適于心肌梗死發病機制、預防措施等研究。
(4)由于小型豬心臟冠狀動脈側支循環少,突然的冠脈阻斷易于誘發心室纖顫,成為造模失敗的主要因素,此外,也有呼吸道阻塞、麻醉意外、造影術造成動物死亡的報道

  • 實驗犬

1.手術方式
犬的手術造模方式與小型豬相似。將犬固定于手術臺,右側臥位,氣管插管,連接呼吸麻醉機,左側胸前4-5肋間區域備皮消毒,沿肋間隙做切口,逐層切開分離皮膚及筋膜肌肉,打開胸腔,暴露心臟,在預缺血區域前的冠脈上結扎,一般多為前降支分支。心電圖出現ST段呈弓背向上型抬高以確定心肌梗死(myocardial infarction, MI)模型成功關閉胸腔,逐層縫合,引流管排氣。待犬只正常蘇醒后送回護理區。術后正常飼養,給予手術后三天常規抗生素及鎮痛藥。




2.模型特點
(1)與小型豬不同,實驗犬側支循環比較豐富,誘發心室纖顫幾率較之更小,所以相對更安全。
(2)不同犬種之間,側支循環差異較大,容易造成成模差異性較大,盡量選擇單一品種犬只。

  • 新西蘭兔

1.手術方式
兔子稱重后肌內注射速眠新0.1ml/kg,待麻醉深度后將兔子仰位固定在手術臺上。對新西蘭兔進行有創或者無創氣管插管,連接呼吸機,用異氟烷進行維持麻醉,手術中機械通氣輔助呼吸。胸部剃毛,常規消毒后鋪無菌洞巾。沿胸骨正中線切開皮膚、肌肉,小拉鉤輕輕撐開胸腔,用小彎鉗輕提并小心剪開心包,懸吊心包在皮下充分暴露心臟。用無齒鑷輕輕提起左心耳,沿左心耳向左找到左冠狀動脈起始部,于左冠狀動脈前降支距主動脈根部冠狀動脈開口3mm處結扎冠狀動脈,肉眼觀察結扎后冠狀動脈供血區域顏色變暗,搏動減弱,如無此改變則再次結扎血管,以確保足夠數量的心肌發生壞死,然后接心電圖出現ST段呈弓背向上型抬高以確定心肌梗死(myocardial infarction, MI)模型成功。關胸前心包腔留置14號頭皮針導管接10ml注射器,關胸后抽出心包腔內殘留氣體并拔除。肌內注射哌拉西林1g預防傷口感染。手術后將兔子側臥保暖,等待麻醉蘇醒后放回兔籠。


2.模型特點
(1)正中開胸操作簡單,手術視野清晰,心臟暴露充分,但缺點很明顯,創口過大,術后不好恢復,也可以選擇側切,同小型豬,比格犬
(2)結扎后應做心電圖,出現sT段呈弓背向上型抬高才能確定急性心肌梗死(MI)模型制備成功,如不出現可繼續第2次再結扎,但一般不超過3次,以免對心肌組織損傷過大;
(3)結扎時要注意冠狀動脈前降支的變異,以免漏扎導致模型不成功