氣管滴注/氣管插管這一給藥方式具有給藥量準確、動物應激小等優點而廣泛應用于肺相關疾病造模。常見的慢阻肺造模方法有:
如何進行氣管滴注?
Step1:滴注前準備
動物:♀ ♂均可,6-8w,balb/c、C57BL/6J均可其他用品:麻醉機(含異氟烷)、鼠板、10-100ul移液槍、棉簽、小鼠壓舌燈、鑷子、皮筋等。
Step2:將動物置于誘導箱中麻醉,然后放在鼠板上用皮筋固定門齒和腹部(皮筋可以用乳膠手套上的那根,柔軟且彈力適中)。
Step3:鑷子拉出小鼠舌頭,插入棉簽,以沾干口腔內的唾液,否則過多的唾液容易遮擋視線,不利于觀察到開合的聲門。
Step4:手指捏住舌頭,伸入壓舌燈,觀察聲門開合的位置
Step5:向聲門緩慢滴加10-40ul藥物
Step6:藥物滴加完成后,用無針頭的注射器從鼻孔向下緩慢推大約500ul空氣,使藥物均勻分布。
Step7:將給藥后的鼠放在耳邊,可聽到清晰的呼吸音,類似于人咳嗽或“咯痰”聲,說明給藥成功。鼠放回鼠籠,1min內即可蘇醒。
模型評價
以黑墨水示意藥物分布,可以看到左右肺葉均有著色。
根據藥物毒性或小鼠對藥物的反應不同可以發現,有的小鼠在給藥后會出現體重下降、毛發凌亂等問題,這些現象也可以從側面反映出藥物對小鼠發揮了作用。
取材
分子水平 | 肺泡灌洗液 | 檢測細胞因子,如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平,反應炎癥水平 |
病理水平 | 肺葉、氣管 | HE染色,直觀 |
小tips:
小鼠在自然體位下,食管和氣管是并行的,食管貼近背部,氣管貼近胸部,因此在灌胃時需要灌胃針從嘴角進針,貼住上顎然后下行。而氣管給藥時需要向胸部貼近才能看到聲門。給藥工具除了移液槍外,還可以選擇灌胃針進行氣管給藥,此時灌胃針在氣管中上下移動時可感覺到氣管沒有食管那么光滑,進而進一步判斷給藥位置。