動(dòng)物品種 | SD/C57 |
動(dòng)物性別 | 雄性 |
動(dòng)物周齡 | 220g-250g/8周齡 |
造模方法 | 膽總管結(jié)扎(膽汁淤積性肝硬化): 適應(yīng)性飼養(yǎng)7天,于術(shù)前禁食16h,氣麻,麻醉大鼠/小鼠,常規(guī)消毒備皮鋪巾。在劍突處向下2cmm的地方剪開(kāi)大鼠/小鼠皮膚,將皮膚與肌層稍作鐘性分離,沿大鼠/小鼠腹白線剪開(kāi)大鼠腹壁肌肉、腹膜,用止血鉗分別夾住左、右兩邊肌層和皮膚層,以更好地暴露腹腔。找到從肝門(mén)部朝著十二指腸的方向走行的膽總管,小心分離膽總管周?chē)Y(jié)締組織,分離出一段膽總管,用4/0號(hào)線雙重結(jié)扎膽總管(結(jié)扎不能過(guò)緊,否則死亡率升高).然后逐層關(guān)腹, 縫合切口。手術(shù)肌注青霉素3日以預(yù)防感染。按體重進(jìn)行隨機(jī)分組 硫代乙酰胺(TAA)誘導(dǎo): 大鼠/小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,用硫代乙酰胺(TAA)200mg/kg腹腔注射大鼠,2次/周,連續(xù)給藥染毒10周,再停藥觀察2~3周進(jìn)行取材檢測(cè) |
成模鑒定 | 1. 血清生化檢測(cè)肝功能指標(biāo):白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、總膽紅素(TB)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽固醇(TC)、總膽汁酸(TBA)、谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶(GGT)、球蛋白(GLOB*)、白球比*(A/G*)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT )、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST) |
造模周期 | 4周/10周 |
后續(xù)檢測(cè)指標(biāo)建議 | a. 病理檢測(cè):肝臟切片做HE染色及masson染色,鏡下觀察病理組織變化,包括肝纖維間隔及假小葉的形成等病理變化特點(diǎn)。鏡下觀察假小葉形成、結(jié)合肉眼所見(jiàn)肝硬化結(jié)節(jié)為肝硬化模型誘導(dǎo)成功。 b. 肝臟組織切片免疫熒光染色:DCOL-I、COL-II的表達(dá)蛋白印跡(WB)法及免疫組化檢測(cè):肝臟組織中eIF-4E、P4EBP1及4EBP1 |
備注 | 膽總管結(jié)扎為我司常規(guī)操作,TAA藥物誘導(dǎo)法成模率低且周期長(zhǎng)不建議客戶(hù)使用 |