細胞轉染的基本原理是將外源的DNA克隆到載體上后導入細胞，借助宿主細胞表達載體上的目的片段，從而使目的基因在細胞中發揮功能。目前轉染方法有多種，如脂質體轉染法、磷酸鈣-DNA共沉淀法、電穿孔轉染法、腺病毒感染等。

常規轉染技術可分為兩大類，一類是瞬時轉染，另一類是穩定轉染。瞬時轉染的外源DNA不整合到宿主的染色體中，通常表達只持續幾天，一般在轉染24-72小時后檢測。穩定轉染的外源DNA將整合到宿主染色體中，可持續性表達，一般用于穩定細胞株的構建。

服務內容

l 脂質體轉染（瞬轉）

1.載體構建（可選），RNAi合成（視轉染情況而定）；

2.將細胞按照1~3x10⁵接種到6孔板中，加入2~4mL的完全培養基，混勻放置在二氧化碳培養中，37℃過夜；

3.無菌狀態下配置如下液體：

  a.用100μL的Opti-MEM培養基稀釋2μg的待轉染質粒；

  b.用100μL的Opti-MEM培養基稀釋25μL的Lipofectamine轉染試劑；

4.將a, b液混合并混勻，室溫放置15min；

5.細胞培養至80%單層左右，用Opti-MEM培養基洗滌細胞兩次，每孔加入1mL Opti-MEM培養基，并將混合后的ab溶液逐滴加入到每孔中，按十字方向輕搖混勻，二氧化碳培養箱中培養；

6. 4-6小時后將轉染液吸出，換為新的完全培養基繼續培養，培養3-4天后檢測蛋白表達量。

l 腺病毒轉染（瞬轉）

1.腺病毒質粒構建；

2.以脂質體轉染的方法包裝腺病毒，測其滴度；

3.不同MOI下測試得最佳轉染效率值；

4.使用最佳MOI對細胞進行轉染。

l 慢病毒轉染（穩轉）

1.慢病毒質粒構建；

2.以脂質體轉染的方法包裝慢病毒，測其滴度；

3.不同MOI下測試得最佳轉染效率值；

4.使用最佳MOI對細胞進行轉染；

5.進行穩轉株篩選。