服務(wù)介紹
細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率,表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量。貼壁后的細(xì)胞不一定每個(gè)都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細(xì)胞必為貼壁和有增殖活力的細(xì)胞。克隆形成率能夠反應(yīng)細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個(gè)重要性狀。
服務(wù)內(nèi)容
1) 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,分別用0.25%胰酶消化并吹打成單細(xì)胞狀態(tài);
2) 將細(xì)胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋,每組細(xì)胞分別以每皿50、100、200個(gè)細(xì)胞的梯度密度分別接種含培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng),使細(xì)胞分散均勻。將培養(yǎng)皿置于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2~3周(根據(jù)細(xì)胞種類和生長(zhǎng)狀況);
3) 經(jīng)常觀察,當(dāng)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時(shí),終止培養(yǎng)。棄去上清液,用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定