不同配方的 Matrigel膠可以滿足不同的實驗要求,參考如下:
a、低生長因子(GFR)的Matrigel基底膜基質膠適用于對基質成分要求嚴格的實驗,如細胞信號通路和細胞因子的研究等;
b、不含酚紅的Matrigel膠適用于熒光檢測或顯色反應等分析;
c、高濃度的Matrigel膠適用于研究血管生成、腫瘤細胞遷移和體內腫瘤模型的建立等
1. 體外實驗
(1)細胞侵襲實驗
運用小室建立體外模型,在上室鋪上一層Matrigel膠,再接種細胞,腫瘤細胞粘附于Matrigel膠,通過對Matrigel膠的降解作用,使其能夠穿過Matrigel膠和濾膜到達下室側濾膜。該實驗能夠更加真實地模擬腫瘤細胞侵襲過程。
(2)類器官培養
將適當的多能干細胞或者特定組織的祖細胞嵌入Matrigel膠或者其他適當的細胞外基質中,培養基則使用含有特定生長因子的細胞培養基模擬維持干細胞群所需的體內信號。在此生長條件下,嵌入的細胞增殖并自我組織成3D類器官結構,并在許多系統中可進行無限期傳代和維持培養。
(3)細胞生長
適用于極化細胞的培養,如表皮細胞;也可促進多種細胞的繁殖,如肝細胞、內皮細胞、平滑肌細胞。
(4)干細胞研究
在無小鼠胚胎纖維元滋養細胞環境下,維持和擴展非分化胚胎干細胞。
(5)血管生成實驗
該實驗能很好的模擬腫瘤的血管發生過程,并且適合研究藥物對此過程的影響。
2. 體內實驗
(1)腫瘤皮下移植瘤模型
使用Matrigel膠可提高成瘤細胞在體內成瘤的比例和速度,還可以使某些單獨注射不成瘤的細胞在體內成瘤。
(2)原位模型
利用Matrigel膠在室溫下短時間內形成的三維基質結構使腫瘤細胞在原位固定生長,Matrigel膠組分也是腫瘤形成不可或缺的營養成分,有利于腫瘤細胞的快速生長。
三、注意事項
(1)Matrigel在10℃以上即可成膠,在操作過程中,保持Matrigel一直置于冰上,所有接觸Matrigel的細胞培養器皿,移液吸頭,分裝管等都必須預冷后使用哦。
(2)Matrigel基質會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2 作用引起的,與5%CO2 平衡后色差即會減少。凍融后,需輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel 分散均勻。
(3)溶解時可將Matrigel 基質置于4℃冰箱內冰上過夜溶解。成膠后的Matrigel可以在4℃ 24-48h后重新呈液態。
參考文獻
【1】李杰, 繆維芳, 吳秀蘭. Matrigel在腫瘤體內外研究模型中的應用[J]. 海峽藥學, 2014(8):74-76.
【2】Blackmore, K.A., Nutritional status dictates the rate and mode of intestinal epithelial stem cell proliferation through an AMPK dependent mechanism. 2016.
【3】Snippert H J. Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.[J]. Nature, 2009, 459(7244):262-265.
【4】宋健, 李宗義, 徐國彤, et al. 誘導人胚胎干細胞分化形成具有三維結構的視網膜樣組織的方法研究[J]. 中華細胞與干細胞雜志(電子版), 2016, 6(3).
【5】張龍, 孫曉娟, 陳成龍,等. Matrigel對人骨肉瘤動物模型移植瘤形成的影響[J]. 腫瘤研究與臨床, 2017, 29(11):721-725.
【6】李寧, 張曉曄, 蔣中秀, et al. 小鼠Lewis肺癌原位模型的建立[J]. 中國實驗動物學報, 2014(5):79-83.