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探秘之小鼠動情期區分實驗

發布時間:2024-07-25
探秘之小鼠動情期區分實驗

做過繁育相關課題的科研寶子們估計都曾經思考過這樣一個問題:怎樣才能提高小鼠的繁育成功率呢?有經驗的師兄師姐會這樣回答:那當然是在小鼠動情期合籠成功率是最高的

本期知識分享將帶您探秘小鼠動情周期,并將靈賦拓普生物多年總結出的經驗傾囊相授~

 

什么是小鼠動情周期?

小鼠動情周期是雌性小鼠在生殖系統中的周期性變化,通常持續4至5天。這一周期包括了卵泡發育、排卵和子宮內膜準備等過程。與人類的月經周期類似,小鼠的動情周期也是受到內分泌激素的調控,如雌激素和孕激素

 

 

怎樣區分動情周期?

1. 生殖器官外觀:

小鼠的生殖器官在不同的動情周期階段也會有所變化,如子宮顏色和大小、卵巢大小等;(不過要觀察這些的話,務必是要傷害到鼠鼠了!)

 

2. 行為特征:

小鼠在動情周期的不同階段會表現出不同的行為特征,如活動性增加、尿液標記物的變化等(這樣的觀察比較主觀,得出的結果也就不那么準確)。

 

3. 陰道細胞涂片:

可以通過取得小鼠陰道內的細胞涂片,觀察陰道上皮細胞的形態變化來確定小鼠的動情周期階段。在動情周期的不同階段,陰道細胞的形態會發生變化,如核的形狀和大小。

 

 

陰道細胞涂片

可以通過取得小鼠陰道內的細胞涂片,觀察陰道上皮細胞的形態變化來確定小鼠的動情周期階段。在動情周期的不同階段,陰道細胞的形態會發生變化,如核的形狀和大小。

 

以下是靈賦拓普生物技術團隊分享的一些做的陰道細胞涂片的寶貴經驗:

 

1.實驗準備

載玻片,棉球,棉棒,顯微鑷,生理鹽水,福爾馬林,瑞氏-吉姆薩染液,純水,中性樹脂,顯微鏡,蓋玻片

 

2.涂片制作

a.將顯微鑷卷上棉絮,卷為米粒大小,沾濕生理鹽水,插入小鼠陰道口0.5-1cm,將鑷子貼在陰道壁上從里往外刮10次(保持每只鼠同樣力度與次數,大鼠則采用棉棒);

b.將鑷子棉球放在玻片中央正上空,滴加生理鹽水直至有液滴掛在棉球上而不掉落,慢慢轉動棉棒使細胞盡可能多的被洗進液滴里;

c.將液滴從撥片中央往四周平鋪開來(棉棒不要觸碰到玻片,摩擦會使細胞破裂),自然風干。

 

3.涂片固定:

光下轉動撥片觀察涂片剛好風干后(風干太久會使細胞破裂,影響后續效果)放入4%多聚甲醛中固定10min,用純水洗凈殘留的固定液。

 

4.涂片染色:

配置染液前與滴加染液前務必充分搖勻,將玻片殘留水分盡量甩干,從旁邊滴加染液,用tip頭鋪平(勿觸碰玻片),避光常溫孵育10min后(可回收染液,以備觀察后還需要復染),清水洗凈,鏡下觀察。

 

5.封片:

鏡下觀察,細胞均勻,背景干凈無雜質,上色程度理想,即可封片,撥片中央滴加中性樹脂后蓋蓋玻片,平放靜至過夜后切片盒內保存。

 

涂片區分動情期?

首先我們要知道陰道脫落細胞主要有3 種:白細胞,有核上皮細胞,角化細胞。

 

1.動情前期涂片大部分是有核上皮細胞,偶有少量角化細胞;

2.隨著卵泡加速生長,有核上皮細胞逐漸轉化成成熟無核角化細胞進入動情期,全部是無核角化細胞或間有少量上皮細胞;

3.隨即又開始出現白細胞,而無核角化細胞慢慢減少,此時出現 3 種細胞(白細胞角化細胞有核上皮細胞)同時存在的現象,證明已進入動情后期;

4.隨后,角化細胞不斷減少白細胞不斷增多,轉化為以白細胞為主,逐漸進入動情間期;通常見到以角化細胞為主則認為進動情期。

 

以下是我們靈賦拓普生物技術員辛勤勞作的結果,供大家參考: