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動(dòng)物脫毛模型:醫(yī)療美容研究之不長發(fā)那些事兒

發(fā)布時(shí)間:2024-10-12
動(dòng)物脫毛模型:醫(yī)療美容研究之不長發(fā)那些事兒

毛發(fā)生長是一個(gè)復(fù)雜的過程,受遺傳、營養(yǎng)、環(huán)境等因素的影響。脫發(fā)是一種遺傳因素、自身免疫性疾病、壓力和營養(yǎng)失衡等引起的毛發(fā)再生障礙不僅影響容貌,而且會(huì)使患者產(chǎn)生焦慮、自卑等不良心理隨著脫發(fā)人數(shù)的增加,脫發(fā)已成為當(dāng)今社會(huì)最常見的健康問題。頭發(fā)生長周期包括三個(gè)階段:生長期、退行期和休止期。毛發(fā)生長障礙主要原因是毛囊循環(huán)的改變,即生長期縮短和休止期延長。因此,調(diào)控毛囊的生長周期在改善脫發(fā)和促進(jìn)毛發(fā)再生中至關(guān)重要。

一、為什么要進(jìn)行動(dòng)物脫毛

1、動(dòng)物靜脈注射或抽取血液

2、用于制備動(dòng)物脫毛模型

二、動(dòng)物被毛去除方法優(yōu)缺點(diǎn)集合

方法

優(yōu)缺點(diǎn)

拔毛法

主要適用于家兔耳緣靜脈注射或采血用,不適用于動(dòng)物其他部位的去毛。

剪毛法

如果操作不當(dāng)例如用手捉著動(dòng)物皮毛剪,易剪傷動(dòng)物皮膚,影響下一步實(shí)驗(yàn)。剪毛法的一個(gè)最大的弊端就是剪下的被毛可到處亂飛,易導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室的污染。

剃毛法

用剃毛刀剃毛也容易造成動(dòng)物皮膚的損傷和感染。

脫毛膏脫毛

對(duì)動(dòng)物皮膚刺激性小,脫毛后7 d內(nèi)觀察幾種動(dòng)物均無皮膚充血和炎癥反應(yīng)等現(xiàn)象。

三、常見的動(dòng)物脫毛模型方法及作用機(jī)理

1、松香石蠟拔毛模型:將松香和石蠟融化后按照1 ∶ 1的比例混合,置于室溫適當(dāng)降溫,防止?fàn)C傷小鼠皮膚。將松香石蠟混合物均勻涂在小鼠背部其熱量有利于擴(kuò)張毛囊以利于毛發(fā)脫離,待混合物變硬后撕除,可觀察到脫毛后的小鼠背部皮膚呈粉紅色。該方法操作簡(jiǎn)單,耗時(shí)短。適用于評(píng)價(jià)毛發(fā)生長情況、毛發(fā)生長期的研究

 HE病理觀察毛囊情況:在第 7 天時(shí),模型組的毛囊大部分仍處于休止期,其毛囊形態(tài)較小,位置較淺 在第 14 天時(shí),毛囊均處于生長期,模型組黑色素分泌較少,顏色較淡在第 21 天時(shí),模型組毛囊開始退化,形態(tài)上變短且細(xì)小。

毛發(fā)生長情況評(píng)估在實(shí)驗(yàn)第 0天拔毛后,小鼠的背部皮膚顏色為粉色,毛囊同步進(jìn)入休止期。在實(shí)驗(yàn)期間,可觀察到和脫毛區(qū)域周圍原生毛發(fā)顏色相比,小鼠新生毛發(fā)顏色較黑。

2、脫毛膏脫毛模型:將小鼠背部毛發(fā)用電動(dòng)剃毛器剔除后,均勻涂抹脫毛膏,面積約為 2 cm × 2 cm。放置 2 min 后,輕輕用脫脂棉擦去皮膚表面的脫毛膏,并用溫水清洗干凈。利用其化學(xué)物質(zhì)軟化并毀斷構(gòu)成毛發(fā)的角質(zhì)蛋白分子鏈,從而切斷毛發(fā)纖維,使毛發(fā)脫除。需要注意的是:1次可能會(huì)有脫不干凈的情況,需要重復(fù)操作。

HE病理觀察毛囊情況:8 周齡小鼠毛囊大部分處于休止期,此時(shí)的毛囊下段退化,毛乳頭上移至立毛肌附著處。給藥 6 d后,給藥組小鼠毛囊向下生長至皮下深層,進(jìn)入生長期,而 PBS 組仍停滯在真皮層給藥 12 d 后,黑色素囤積,小鼠皮膚毛囊數(shù)增多,給藥組毛囊數(shù)量明顯多于 PBS 組。

毛發(fā)生長情況評(píng)估在造模完成后立即對(duì)小鼠背部進(jìn)行拍照,此后每 48 h 進(jìn)行拍照。各組脫毛后,皮膚均呈粉紅色,毛發(fā)進(jìn)入休止期。給藥 6 d 后,給藥組開始變黑;給藥 8 d 后,給藥組明顯變黑而 PBS 組還呈粉紅色;給藥 12 d 后,給藥組均長出 1 層細(xì)密的毛發(fā),而對(duì)照組僅部分區(qū)域長出毛發(fā)。

3、雄激素性脫發(fā)模型:利用小動(dòng)物剃毛器將小鼠背部毛發(fā)剃短,并涂抹脫毛膏使殘余的毛發(fā)脫除,當(dāng)小鼠皮膚呈粉紅色且無破損時(shí),即可確認(rèn)其毛囊處于休止期。后以 5 mg/kg的劑量用丙酸睪酮稀釋液于小鼠背部脫毛區(qū)域進(jìn)行皮下多點(diǎn)注射,1 /d,連續(xù)注射 60 d 造模。細(xì)胞質(zhì)中有5α-還原酶能將睪酮轉(zhuǎn)化為二氫睪酮(DHT),其作用較睪酮強(qiáng)5倍。DHT進(jìn)入細(xì)胞核,對(duì)代謝系統(tǒng)產(chǎn)生作用,影響毛發(fā)蛋白合成,致使毛母質(zhì)細(xì)胞失去活力,開始角質(zhì)化,發(fā)展為休止期毛發(fā),最終毛發(fā)脫落。另外,DHT對(duì)毛囊產(chǎn)生毒性作用,使毛囊逐漸萎縮,導(dǎo)致毛發(fā)生長周期縮短,加速脫發(fā)的進(jìn)程。該模型的脫毛具有可逆性適用于脫發(fā)機(jī)制的研究

HE病理觀察毛囊情況:與空白組(未注射丙酸睪酮比較,模型組小鼠單位面積皮膚組織中含黑色素毛囊數(shù)量與總毛囊數(shù)量比值顯著降低

毛發(fā)生長情況評(píng)估與空白組(未注射丙酸睪酮比較,模型組小鼠新生毛發(fā)面積在脫毛區(qū)域中的占比和新生毛發(fā)的長度及重量均顯著降低,表明皮下注射丙酸睪酮導(dǎo)致小鼠出現(xiàn)毛發(fā)脫落的現(xiàn)象,且小鼠毛長及毛重降低。

當(dāng)然除了上述常見的脫毛模型,還有1、背部涂抹咪喹莫特構(gòu)建免疫調(diào)節(jié)劑脫發(fā)模型,與人類斑禿相似性較大,方法簡(jiǎn)單、可靠,重復(fù)性好,成本低廉;218個(gè)月齡C3H/HeJ小鼠和3-4月齡DEBR大鼠自發(fā)性脫發(fā)模型,與人體自然衰老所引起的脫發(fā)機(jī)制最為接近;3、應(yīng)用環(huán)磷酰胺腹腔注射,通過誘導(dǎo)生長期毛囊營養(yǎng)不良性改變或造成更嚴(yán)重的損害,使毛囊過早地向退行期改變,建立化療脫發(fā)(CIA)模型,該模型適用于化療藥物引起的脫發(fā)病理生理學(xué)機(jī)制以及實(shí)驗(yàn)藥物治療學(xué)研究。在實(shí)驗(yàn)研究過程中我們可以從藥物作用機(jī)理出發(fā),選擇對(duì)應(yīng)的動(dòng)物脫毛模型,從而達(dá)到高效準(zhǔn)確的研究成果。