腸道中含有數(shù)量巨大的微生物，這些微生物在維持人類生命健康方面發(fā)揮著重要作用。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)腸道微生物與炎性腸病（IBD）、結(jié)直腸癌（CRC）、肥胖、二型糖尿病等多種疾病密切相關(guān)。因此，加強(qiáng)對(duì)腸道微生態(tài)的了解有助于對(duì)一些腸道疾病的診斷及治療。

腸道微生物群的檢測(cè)方法眾多，通過(guò)研究小鼠糞便中微生物的群落結(jié)構(gòu)來(lái)反映腸道微生態(tài)是許多研究人員選用的方法。采集糞便簡(jiǎn)單，易操作，但具體如何操作，如何避免糞便樣本被雜菌污染，仍有諸多細(xì)節(jié)需要注意。

采集流程

1準(zhǔn)備采便所需器材
采便器，鑷子或者牙簽，紙巾，采集管，酒精噴壺，冰盒，超凈臺(tái)

注：如果沒(méi)有采便器，可以使用滅菌后的空鼠籠代替

2高溫高壓或紫外滅菌器材
將采便器或者空鼠籠，鑷子或者牙簽，紙巾，采集管通過(guò)高溫高壓滅菌后傳入動(dòng)物房。無(wú)法通過(guò)高溫高壓滅菌的，紫外線照射30分鐘后通過(guò)傳遞窗傳入。然后將器材放置超凈臺(tái)。

3 促使小鼠應(yīng)激排便，或者將小鼠放入采便器，等待自然排便

應(yīng)激排便：采集樣本較少（1-2顆）及小鼠排便正常時(shí)，可以直接應(yīng)激排便，固定小鼠，將其尾部提起，用手指輕輕按壓小鼠下腹部，小鼠排便后及時(shí)采集到無(wú)菌的EP管中。

自然排便：采集樣本較多時(shí)，將小鼠放入采便器或者空鼠籠，等待小鼠自然排便。小鼠排便過(guò)程中，及時(shí)采集小鼠糞便，避免小鼠將糞便踩踏污染。小鼠排便到足夠的數(shù)量后及時(shí)將小鼠放回飼養(yǎng)籠中。

注：如果使用空鼠籠，需要鋪墊紙巾，避免小鼠尿液污染，采便器中層有紗網(wǎng)，尿液可以直接漏下去。小鼠活動(dòng)面積越大，越能避免踩踏糞便。

4 取出糞便及保存

使用鑷子或者牙簽采取糞便，采取下一只小鼠糞便的時(shí)候，需要酒精擦拭鑷子或者換一根新的牙簽，避免不同小鼠之間糞便污染。將采取的糞便及時(shí)放入采集管，置于冰盒中，最后及時(shí)轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存。如果糞便形狀不同，或者有便血的情況，需要做好記錄。

注意事項(xiàng)

1糞便樣本采集在一天的同一時(shí)段進(jìn)行（最好是早晨）避免微生物組成在同一天不同時(shí)間內(nèi)發(fā)生變化。采集糞便場(chǎng)所光線充足，保持通風(fēng)。

2 采便過(guò)程中，需要時(shí)刻關(guān)注小鼠排便情況，及時(shí)采取，避免踩踏污染。

3無(wú)菌采便需要的器械必須高溫高壓和或者紫外滅菌，在超凈臺(tái)使用。

4 如小鼠不排便，可順時(shí)針按摩腹部或者使用濕棉簽擦拭肛門，促進(jìn)排便。

5 采便時(shí)觀察小鼠糞便形狀以及是否便血，做好糞便記錄。

6 取出的糞便及時(shí)放到冰上，最終轉(zhuǎn)入-80℃冰箱保存。

7 在實(shí)驗(yàn)飼養(yǎng)期間，要盡量保持整個(gè)過(guò)程中飼料和墊料的一致性，最好采用同一批次