近年來，終末期腎臟疾病患者數(shù)量劇增，患者只能通過血液透析或者更換腎臟器官才能維持生命。

自體動靜脈瘺(arteriovenous fistula，AVF)是各指南推薦的首選血液透析通路，但其1年通暢率僅 60%，即使再次干預(yù)其結(jié)果和預(yù)后也不滿意。血液透析通路是血液透析患者的生命線，維持血液透析通路的正常功能非常重要。

動靜脈內(nèi)瘺術(shù)是一種血管吻合術(shù)，通過吻合鄰近動靜脈使吻合后的靜脈中流著動脈血，可形成血管內(nèi)瘺為血液透析提供足夠血量。而血管內(nèi)瘺功能障礙時有發(fā)生，主要表現(xiàn)為內(nèi)瘺狹窄和血栓，嚴(yán)重影響甚至危及患者生命安全。故通過建立大鼠動靜脈內(nèi)瘺模型，研究內(nèi)瘺狹窄病理機制，探究靜脈血管內(nèi)膜增生的病理變化以指導(dǎo)臨床治療和藥物研究。

一、動靜脈瘺模型分類

頸部動靜脈瘺模型

腹股溝區(qū)動靜脈瘺模型

腹部動靜脈瘺模型

二、操作方法  

實驗動物：

SD大鼠/Wistar大鼠，6-8w，雄性； 

術(shù)前準(zhǔn)備：

手術(shù)刀1把、10cm手術(shù)剪1把、10cm鑷子2把、電凝止血筆1個、拉鉤2個、顯微持針器1把、眼科鑷2把，250UI/ml 肝素鈉生理鹽水、1ml\5ml\10ml注射器、2%戊巴比妥鈉碘伏(150mg/kg)、2mm PE管、4-0縫合線、12-0縫合線，棉簽、紗布、碘伏。

術(shù)前麻醉：

將實驗鼠放進連接好的麻醉機誘導(dǎo)箱，調(diào)整異氟烷濃度至5%，完成誘導(dǎo)麻醉后將實驗鼠仰臥位固定在手術(shù)板上，調(diào)整異氟烷濃度至2%，連接面罩并持續(xù)吸入。手術(shù)期間氣體麻醉維持。碘伏消毒術(shù)區(qū)。

 三、頸部動靜脈瘺模型

常規(guī)方法：

大鼠碘伏消毒頸部，分離右側(cè)頸外靜脈、頸內(nèi)靜脈，結(jié)扎頸外靜脈及頸內(nèi)靜脈遠心端，離斷頸內(nèi)靜脈，隨后分離右側(cè)頸總動脈結(jié)扎遠心端，離斷頸總動脈，在手術(shù)顯微鏡下12-0縫線行右側(cè)頸總動脈－頸內(nèi)靜脈端端吻合，觀察該段血運情況。

套管法：

大鼠碘伏消毒頸部，分離頸靜脈，動脈夾夾閉頸總動脈近心端，結(jié)扎頸總動脈分支處，于分支處剪斷血管，肝素鈉生理鹽水沖洗血管內(nèi)，將血管套管后，結(jié)扎套管中段，隨后將套管伸入頸靜脈近心端，結(jié)扎套管中段。操作完成后松開動脈夾，觀察該段血運情況。

術(shù)后觀察：

成功可見動脈血流經(jīng)吻合口，靜脈擴張充盈，術(shù)后低分子肝素抗凝和青霉素鈉皮下注射3天抗感染。

模型特點：

1、3～4 周的通暢率可達100%，且死亡率僅6%；

2、單純的切斷同側(cè)頸動靜脈并不會引起老鼠出現(xiàn)精神癥；

3、避免由于腹腔手術(shù)導(dǎo)致的可能感染；

病理改變：

造瘺1周后在靜脈段就可見平滑肌細胞增殖及膠原纖維沉積，4 周后膠原纖維和彈力纖維堆積更明顯，且出現(xiàn)靜脈內(nèi)膜增厚、AVF狹窄等表現(xiàn)，組織化學(xué)提示靠近吻合口的新生內(nèi)膜中大量 α 平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)陽性細胞，契合了人 AVF 的病理生理改變。

四、 腹股溝區(qū)動靜脈瘺模型   

 常規(guī)辦法

大鼠碘伏消毒，于大鼠腹股溝處縱行切開皮膚，顯露股動靜脈及其分支，行股動靜脈端端或端側(cè)吻合，整個手術(shù)時間約為57min。

術(shù)后觀察：

成功可見動脈血流經(jīng)吻合口，靜脈擴張充盈，術(shù)后低分子肝素抗凝和青霉素鈉皮下注射3天抗感染。

模型特點：

1、檢查發(fā)現(xiàn)大鼠在造模前后平均動脈壓、心率、全身血流動力學(xué)均無明顯改變；

2、模型死亡率低，僅為 0～15%，主要死因為出血及食道穿孔，靜脈高壓導(dǎo)致的水腫或缺血是最常見的非手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥，但發(fā)生比例均很低；

3、存在腹腔感染的風(fēng)險；

病理改變：

造模后3周的通暢率為91%。成模后靜脈段擴張及內(nèi)膜增生明顯，造瘺1周后炎性因子、核因子κB和激活蛋白-1表達升高，4周后MCP-1、PAI-1等炎癥因子也出現(xiàn)高表達，并出現(xiàn)單核細胞及巨噬細胞浸潤至靜脈壁的現(xiàn)象。

 五、腹部動靜脈瘺模型  

腎切除法：

取腹正中切口進腹，顯露下腔靜脈及腹主動脈、腎下腔靜脈，在術(shù)中切除一側(cè)腎臟，保留腎靜脈，使用殘留腎靜脈與腹主動脈吻合。整個手術(shù)時間約45分鐘。

穿刺法：

取腹正中切口進腹，顯露下腔靜脈及腹主動脈、腎下腔靜脈，在阻斷腎下腔靜脈及主動脈后，在腹主動脈中下 1/3 處用18G注射針頭同時穿破腹主動脈及下腔靜脈，通過單純縫合或生物膠配合局部壓迫達到主動脈-腔靜脈瘺成型的效果。

術(shù)后觀察：

成功可見動脈血流經(jīng)吻合口，靜脈擴張充盈，術(shù)后低分子肝素抗凝和青霉素鈉皮下注射3天抗感染。

模型特點：

1、穿刺法技術(shù)簡單，可重復(fù)性高，手術(shù)時間短，造模結(jié)果較佳，且術(shù)后4周的死亡率能控制在10%以 下，且AVF的通暢率達到90%；

2、兩種方法均存在腹腔感染的風(fēng)險；

病理改變：

造模后3周的通暢率為91%。成模后靜脈段擴張及內(nèi)膜增生明顯，造瘺1周后炎性因子、核因子κB和激活蛋白-1表達升高，4周后MCP-1、PAI-1等炎癥因子也出現(xiàn)高表達，并出現(xiàn)單核細胞及巨噬細胞浸潤至靜脈壁的現(xiàn)象。

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