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神奇的Matrigel膠

Time:2024-04-16
Matrigel膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中分離出的基底膜基質(zhì),其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,巢蛋白,硫酸肝素糖蛋白等組成,還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。

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不同配方的 Matrigel膠可以滿足不同的實驗要求,參考如下:

a低生長因子(GFR)的Matrigel基底膜基質(zhì)膠適用于對基質(zhì)成分要求嚴(yán)格的實驗,如細(xì)胞信號通路和細(xì)胞因子的研究等;

b不含酚紅的Matrigel膠適用于熒光檢測或顯色反應(yīng)等分析

c高濃度的Matrigel膠適用于研究血管生成、腫瘤細(xì)胞遷移和體內(nèi)腫瘤模型的建立等

1.      體外實驗

1)細(xì)胞侵襲實驗

運用小室建立體外模型,在上室鋪上一層Matrigel膠,再接種細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞粘附于Matrigel膠,通過對Matrigel膠的降解作用,使其能夠穿過Matrigel膠和濾膜到達下室側(cè)濾膜。該實驗?zāi)軌蚋诱鎸嵉啬M腫瘤細(xì)胞侵襲過程。




2)類器官培養(yǎng)

將適當(dāng)?shù)亩嗄芨杉?xì)胞或者特定組織的祖細(xì)胞嵌入Matrigel膠或者其他適當(dāng)?shù)募?xì)胞外基質(zhì)中,培養(yǎng)基則使用含有特定生長因子的細(xì)胞培養(yǎng)基模擬維持干細(xì)胞群所需的體內(nèi)信號。在此生長條件下,嵌入的細(xì)胞增殖并自我組織成3D類器官結(jié)構(gòu),并在許多系統(tǒng)中可進行無限期傳代和維持培養(yǎng)。


3)細(xì)胞生長

適用于極化細(xì)胞的培養(yǎng),如表皮細(xì)胞;也可促進多種細(xì)胞的繁殖,如肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞。

4)干細(xì)胞研究

在無小鼠胚胎纖維元滋養(yǎng)細(xì)胞環(huán)境下,維持和擴展非分化胚胎干細(xì)胞。


5)血管生成實驗

該實驗?zāi)芎芎玫哪M腫瘤的血管發(fā)生過程,并且適合研究藥物對此過程的影響。

2.    體內(nèi)實驗

1)腫瘤皮下移植瘤模型

使用Matrigel膠可提高成瘤細(xì)胞在體內(nèi)成瘤的比例和速度,還可以使某些單獨注射不成瘤的細(xì)胞在體內(nèi)成瘤。


2)原位模型

利用Matrigel膠在室溫下短時間內(nèi)形成的三維基質(zhì)結(jié)構(gòu)使腫瘤細(xì)胞在原位固定生長,Matrigel膠組分也是腫瘤形成不可或缺的營養(yǎng)成分,有利于腫瘤細(xì)胞的快速生長。


三、注意事項

1Matrigel10℃以上即可成膠,在操作過程中,保持Matrigel一直置于冰上,所有接觸Matrigel的細(xì)胞培養(yǎng)器皿,移液吸頭,分裝管等都必須預(yù)冷后使用哦。

2Matrigel基質(zhì)會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2 作用引起的,與5CO2 平衡后色差即會減少。凍融后,需輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel 分散均勻。

3)溶解時可將Matrigel 基質(zhì)置于4℃冰箱內(nèi)冰上過夜溶解。成膠后的Matrigel可以在4 2448h后重新呈液態(tài)。



參考文獻

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