春-軟骨組織切片
夏-骨頭組織切片
春暖花開、桃紅柳綠、疊翠流金、冰魂雪魄,繽紛的四季,就這樣展現(xiàn)在我們眼前。這些組織和細胞的形、色、光,宛如生命的畫筆,在顯微鏡下綻放著它們的精彩。科學(xué)與藝術(shù)的邂逅,讓我們不得不感嘆生命的純粹和神奇。
好的組織切片,對后續(xù)的染色、檢測至關(guān)重要。今天,小拓就教大家如何進行組織石蠟切片。
動物處死后,立即從動物體取下所需器官,防止組織細胞自溶變性。用生理鹽水將血水清洗后,將組織立即浸入4%多聚甲醛中固定,固定時間>24h。目的是使組織蛋白迅速凝固,使細胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)和成分不再發(fā)生變化,保持組織細胞與活體相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),固定后的組織塊變硬,便于進一步處理。將組織從固定液取出在通風(fēng)櫥內(nèi)用手術(shù)刀將目的部位組織修平整,將修切好的組織和對應(yīng)的標(biāo)簽放于脫水盒內(nèi)。
固定后組織塊內(nèi)含有大量的水分要徹底脫去,以便石蠟浸入。將脫水盒放進吊籃里于脫水機內(nèi)依次梯度酒精進行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min-無水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I 5-10min-二甲苯II 5-10min-65°融化石蠟I 1h-65°融化石蠟II 1h-65°融化石蠟III 1h。
將浸好蠟的組織于包埋機內(nèi)進行包埋。先將融化的蠟放入模具框,待蠟?zāi)讨皩⒔M織從脫水盒內(nèi)取出按照包埋面的要求放入包埋框并貼上對應(yīng)的標(biāo)簽。于-20℃凍臺冷卻,蠟?zāi)毯髮⑾瀴K從模具框中取出并修整蠟塊。
將修整好的蠟塊置于石蠟切片機切片,厚5~8μm,連續(xù)操作可形成蠟帶。用鑷子和毛筆輕輕取下,放于攤片機45℃ 溫水上,使褶皺自然舒展開。載玻片將組織撈起。使其貼片,放置于烤片機(約60℃)烤片。水烤干蠟烤化后取出常溫保存?zhèn)溆谩?/span>
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