動物行為學實驗種類繁多，分為學習記憶類、抗焦慮抑郁類、抗疲勞類、神經精神類、痛覺測試類等，研究不同的疾病模型時，研究人員需根據關注的具體行為選擇合適的研究手段。前兩期（詳情請點擊小鼠行為學實驗（中）：小鼠到底在想什么呀？及小鼠行為學實驗（上））我們分析了動物行為學七個實驗，以此科學客觀地評價其溝通、社交、學習和探索能力等。本期小鼠行為學實驗（下）讓我們繼續盤點小鼠行為學經典實驗。

(八)強迫游泳實驗

?強迫游泳實驗（Forced swimming test）原理主要是讓小鼠被迫在一個局限且無法逃脫的空間游泳，由于嚙齒類動物先天對水厭惡，它們在水中會拼命掙扎游動，并試圖逃離水環境，一段時間后，發現逃離無望時動物停止掙扎表現出“行為絕望”狀態（漂浮不動狀態）。小鼠強迫游泳實驗以游泳的不動時間為主要指標檢測動物的絕望行為，是抗抑郁藥物初篩以及檢測模型動物是否出現抑郁行為的常用檢測實驗。強迫游泳的測試缸為透明圓柱形（直徑15cm，高30cm），測試之前，向缸內加入高15cm的水，水溫保持在23-25℃，將實驗小鼠放入測試缸內，視頻記錄6min，記錄后面4min小鼠不動的時間。

(九)懸尾實驗

?懸尾實驗（Tail suspension test）是一種經典而又能快速評價抗抑郁藥物、興奮藥物、鎮靜藥物藥效的方法。其原理是利用小鼠懸尾后企圖逃脫但又無法逃脫，從而放棄掙扎，進入特有的抑郁不動狀態，實驗過程中記錄動物不動時間來反映抑郁狀態，抗抑郁藥物、興奮藥物能明顯地縮短改變其狀態。將小鼠懸吊在離工作臺20-25cm的地方，用膠帶將小鼠的尾部分后1/3固定在支架上，小鼠只有在被動地完全靜止的情況下才被認為是不動的，在6min的時間內，靜止時間由一個對研究背景不了解的實驗人員記錄。

(十)水迷宮實驗

?水迷宮實驗（Morris water maze）是一種利用動物厭水天性，迫使動物尋找水中隱藏可站立平臺的實驗。并通過對小鼠尋找平臺所花費的時間進行統計分析，判斷動物對于空間位置和方向的記憶能力。在圓形水池（直徑120cm ）中放置一個逃生平臺（直徑10cm ）。水池注入水并用染料將水進行染色，水溫保持在 23±1℃，水迷宮東西南北方向自定義，一般定義為S在實驗者方向，N在實驗者相反的方向，E在右邊，W在左邊，這樣迷宮就分為4個象限，平臺位于其中一個象限的中間。實驗的平臺可放在一個象限中進行所有的實驗，或者平臺在每一個象限中測試1/4的動物，后一種方法抵消了可能的象限效應。一名實驗人員可以使用8種不同的平臺位置。無論選擇哪個象限，平臺通常位于中心和墻壁的中間位置，盡管有時也會使用其他安排。為了防止形成起始位置與目標平臺的產生長短距離，一般起始位置的選擇不應選擇平臺所在的象限起始位置，例如目標是SE，起始位置可選N、W、NE、SW。

獲得性訓練：將小鼠頭朝池壁放入水中，放入位置隨機取東（E）、西（W）、南（S）、北（N）四個起始位置之一。記錄動物找到水下平臺的時間。在前幾次訓練中，如果這個時間超過60s，則引導動物到平臺或直接將動物放在平臺上，讓動物在平臺上停留15s。每只動物每天訓練4次，實驗之間的間隔10-15s到5-15min都可以，訓練5天（如table 1，獲得性訓練的平臺在SW，逆轉訓練的平臺在NE），連續訓練至小鼠找到平臺的時間低于15s。

探查訓練：最后一次獲得性訓練結束后的第二天，將平臺撤除，開始60s的探查訓練。將動物由原先平臺象限的對側放入水中。記錄動物在目標象限（原先放置平臺的象限）所花的時間和進入該象限的次數，以此作為空間記憶的檢測指標。

逆轉訓練：測定動物的工作記憶（working memory）。探查訓練結束后的第二天，開始逆轉訓練。將平臺放在原先平臺所在象限的相反象限，方法與獲得性訓練相同。每天訓練4次。每次記錄找到平臺的時間和游泳距離以及游泳速度。

逆轉探查訓練：最后一次逆轉訓練的第二天進行，方法與上述探查訓練類似；記錄動物60s內動物在目標象限（平臺第二次所在區）所花時間和進入該區的次數。學習和記憶能力評估：記錄測試小鼠在每個象限中花費的時間百分比、在訓練過的平臺位置上經過的次數、在未訓練的象限中的相應區域中花費的時間和游泳速度。通過記錄測試小鼠在每個象限中花費的時間、在訓練的平臺位置上的經過次數和在未訓練的象限中的類似位置所花費的時間進行比較來評估探索試驗中測試小鼠的學習和記憶能力。

(十一）前脈沖抑制實驗

?前脈沖抑制實驗（Prepulse Inhibition，PPI）是一種感覺運動門控的測量方法，中樞神經系統天然具有過濾和篩選信息的能力，以保證思維的連貫性，這個機制稱為感覺運動門控。精神分裂癥具有感覺運動門控失調或前脈沖抑制缺失的現象，PPI被認為是建立精神分裂癥動物模型一個重要的基礎。PPI是指在一個較強的驚跳刺激之前約30-500毫秒（ms）預先給予一個較弱的刺激可以抑制對驚跳刺激的反應程度。本研究中PPI的檢測使用SR-LAB驚跳反射檢測系統（San Diego Instruments，San Diego, CA）。PPI實驗共42個測試（trials）：包括6個驚跳測試（Pulse-alone，120dB），前脈沖刺激和驚跳強刺激聯合測試（Prepulse+Pulse，74-120dB，78-120dB， 82-120dB，86-120dB， 90-120dB）各6個，6個無刺激測試（70dB）。在實驗之前，將每只小鼠在背景白噪聲（背景噪聲70 dB，此強度下的噪聲可以較好地掩蓋實驗室環境噪聲）下適應有機玻璃圓柱體5min。隨后是42個測試以隨機順序出現，平均間隔為15s。測試共有7種類型：測試1（120dB），持續40ms；測試2-6（5種前脈沖強度分別為74dB，78dB， 82dB，86dB,，90dB，前脈沖持續20ms，然后是100ms的間隔，再出現120dB驚跳強刺激，持續時間40ms）；測試7，70 dB背景噪聲；7類測試均出現6次。記錄驚嚇反應65ms，從驚嚇刺激開始每隔1ms測量一次。在65ms采樣窗口內記錄的最大驚嚇幅度（mV_Max）作因變量。由每個前預脈沖強度引起的PPI的百分比（PPI%）計算為[1-（平均Prepulse+Pulse的反應幅度）/（平均Pulse-alone的反應幅度）]×100％。

總結 

靈賦拓普生物擁有大小鼠行為學平臺，提供充分的動物實驗空間，專業行為學實驗設備及記錄分析系統，可提供水迷宮、新物體識別、Y迷宮、轉棒、曠場、強迫游泳、高架十字迷宮等全套測試設備。平臺有專業博士指導，歡迎廣大客戶致電咨詢：0755-86325431，我們竭誠為您服務。