脊髓（spinal cord）呈微扁圓柱體，位于椎管內(nèi)，為腦干向下延伸部分。脊髓由含有神經(jīng)細(xì)胞的灰質(zhì)和含上、下行傳導(dǎo)束的白質(zhì)組成。脊髓發(fā)出31對(duì)脊神經(jīng)分布到四肢和軀干；同時(shí)也是神經(jīng)系統(tǒng)的初級(jí)反射中樞。正常的脊髓活動(dòng)是在大腦的控制下完成的。

在與脊髓相關(guān)的小鼠實(shí)驗(yàn)中，對(duì)脊髓標(biāo)本要求的不用決定了采集方法的不同，現(xiàn)在介紹一下沖洗脊髓采集法（此法適用僅需要完整脊髓，無(wú)需顧及神經(jīng)根），此方法快速且損傷小。

一、器械與耗材

5ML注射器，剪刀，鑷子，直徑10cm培養(yǎng)皿，白色槍頭，生理鹽水

二、操作辦法

（1）將小鼠用二氧化碳安樂(lè)死；

（2）將脊柱剪下，前至寰椎-枕骨大孔，后抵腰骶關(guān)節(jié)；

（3）在寰椎脊髓腔口9點(diǎn)、3點(diǎn)、6點(diǎn)和12點(diǎn)處，縱深剪開(kāi)0.5mm；

（4）用鑷子夾住腰端，取白色槍頭稍稍剪開(kāi)頭部，替換5ML注射器針頭，將5ML注射器充滿生理鹽水。于腰椎斷端，將槍頭部位向近端旋轉(zhuǎn)插入脊髓腔，槍頭孔完全插入脊髓腔內(nèi)2mm；

（5）快速注射，將脊髓完整沖出脊髓腔；

三、結(jié)果展示

四、注意事項(xiàng)

 操作時(shí)注意保護(hù)脊髓。一旦脊髓損傷，將無(wú)法被完整吹出。因此絕不可用斷頸法處死小鼠，因?yàn)檫@樣做必然傷及腰椎，使得沖洗時(shí)沖洗液從腰椎脊髓腔破損部位溢出，不能形成有效沖擊力。

五、動(dòng)物脊髓損傷模型分類

1、挫傷型

重物墜擊器：Allen AR于1911年使用重物墜擊法( WD法) 構(gòu)建脊髓背側(cè)損傷模型。該技術(shù)原理為一定質(zhì)量的物體從限定高度自由降落，撞擊脊髓，其致傷程度可通過(guò)控制重物質(zhì)量和墜落高度來(lái)調(diào)節(jié)，利用該方法能復(fù)制出不同程度的脊髓損傷模型。

電磁打擊器：通過(guò)應(yīng)用步進(jìn)電動(dòng)機(jī)、計(jì)算機(jī)、傳感器、脊柱磁夾固定，打擊器 ( infinite horizon，IH) 能精確控制打擊力度。傳感器能直接測(cè)量打擊裝置對(duì)脊髓的壓力，當(dāng)達(dá)到預(yù)先設(shè)定的壓力時(shí)，打擊接頭會(huì)自動(dòng)撤回，從而避免重物墜擊器出現(xiàn)的反彈現(xiàn)象。然而，脊柱固定的多變性是其最大的缺陷。

2、壓迫型

在臨床中，椎體骨折脫位、爆裂骨折等對(duì)脊髓的損傷往往是持續(xù)性壓迫所致。壓迫型脊髓損傷模型往往通過(guò)動(dòng)脈鉗夾、絲線環(huán)扎/解壓、氣囊等方式對(duì)脊髓造成壓迫，與挫傷型脊髓損傷模型的區(qū)別在于脊髓存在長(zhǎng)時(shí)間的擠壓。

3、缺血損傷型

制作該模型的方法主要有: 血管栓塞法、血管夾閉法、電凝灼閉法等。王正峰等通過(guò)夾閉胸主動(dòng)脈時(shí)間 8、10、12 min 制備小鼠脊髓缺血模型，確定 10 min為最佳夾閉時(shí)間，該動(dòng)物模型可以長(zhǎng)期存活，有利于研究脊髓缺血損傷長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化。金華等改良大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型，通過(guò)電凝腎上腹主動(dòng)脈發(fā)出的椎動(dòng)脈和結(jié)扎腎下腹主動(dòng)脈 60 min、90 min、120 min 后再灌注，該方法能夠有效阻斷腰段脊髓血液供應(yīng)。Chen RK 等通過(guò)雙極電凝器電凝大鼠脊髓背側(cè)中央靜脈制作脊髓缺血損傷模型，該模型較以往單電極能有效限制過(guò)度熱擴(kuò)散，減少鄰近脊髓組織損傷，模型制作一致性較強(qiáng)。

4、橫斷損傷型

完全橫斷或部分橫斷脊髓損傷模型廣泛應(yīng)用于組織工程脊髓損傷后的再生修復(fù)。該模型有利于評(píng)估軸突的再生能力和脊髓的功能恢復(fù)以及神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等對(duì)這一過(guò)程的影響及作用。

2012年，胡煒等通過(guò)自制定量半橫斷刀制作大鼠半橫斷狀缺損模型，該定量半橫斷刀較手術(shù)刀更銳利，能有效減少對(duì)脊髓對(duì)側(cè)的擠壓及牽拉傷，同時(shí)縱切刀的長(zhǎng)度固定，切割的組織長(zhǎng)度一致，避免了人為誤差，術(shù)后觀察對(duì)大鼠死亡率、電生理檢測(cè)、組織形態(tài)學(xué)及運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)行對(duì)比分析，結(jié)果表明經(jīng)定量半橫斷刀制備大鼠脊髓半橫斷損傷模型，制作過(guò)程重復(fù)性好且制成的模型穩(wěn)定，是研究脊髓半橫斷損傷的理想模型。