子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis，EMT）指子宮腔內(nèi)具有活性的內(nèi)膜組織出現(xiàn)在子宮腔以外的位置，是一種常見的婦科疾病。異位的內(nèi)膜周期性出血及其周圍組織纖維化，導(dǎo)致異位結(jié)節(jié)，痛經(jīng)，慢性盆腔痛，月經(jīng)異常和不孕等，對患者的生活質(zhì)量和心理健康都帶來嚴(yán)重的影響。

目前對EMT的研究集中在藥物療效，病理機(jī)制等方面。由于倫理道德的原因，很難對患病婦女進(jìn)行全程觀察，也不能進(jìn)行創(chuàng)傷性、侵襲性或者對照性實(shí)驗(yàn)研究。因此，動物模型成為研究該病的重要手段。
 EMT動物模型主要分為自發(fā)性、誘發(fā)性及種植性三類方法。自發(fā)性的周期長、成本高，且實(shí)驗(yàn)動物必須有規(guī)律的月經(jīng)周期；種植法又稱異體移植法，將人的異位內(nèi)膜組織種植于實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi)，處于醫(yī)學(xué)倫理的考慮，此法不適用于實(shí)驗(yàn)研究的推廣；誘發(fā)性方法中，手術(shù)移植法最為常用，分為同種異體移植法和自體移植法兩種。同種異體移植法避免對實(shí)驗(yàn)動物子宮完整性的破壞，對受體動物創(chuàng)傷性較小，有文章用該法成模率可達(dá)到66.7%。但該法使用率不高，可能實(shí)驗(yàn)動物對同種屬來源的內(nèi)膜組織免疫排斥等因素導(dǎo)致成模率不太穩(wěn)定。自體移植法成模率較高，對實(shí)驗(yàn)動物要求不高，成本低廉，因此自體移植法構(gòu)建EMT動物模型成為該領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)研究的主要方法，多用來觀察EMT的免疫發(fā)病機(jī)制和藥物治療作用，也是我們今天主要介紹的方法。

靈賦拓普之選：

SPF級SD大鼠，雌性，動情周期規(guī)律，6-8周。
操作方法：術(shù)前使用小劑量雌激素使子宮內(nèi)膜充血水腫，增加血液循環(huán)，有利于移植物存活、生長。
麻醉小鼠后，于腹部正中做小切口。切除左側(cè)子宮角，放入生理鹽水中。將子宮內(nèi)膜從肌肉中剝離，然后切成小塊(5mm)。在腹壁上做一個皮下口袋，然后將子宮碎片朝向腹肌放置在口袋中。術(shù)后立即皮下注射苯甲酸雌二醇30μg/ kg，連續(xù)10d，建立大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型。
  
造模之后，不要忘記肌注雌二醇，有利于移植的內(nèi)膜生長。
成模判斷標(biāo)準(zhǔn)
建模兩周后，開腹，觀察移植物的生長情況：
符合以下條件者為成功模型：
移植物體積增大，呈隆起透亮的小囊狀，有些形成多房囊腫，內(nèi)有液體積聚且積液高度≥2mm，外被結(jié)締組織或大網(wǎng)膜覆蓋并有血管生成；游標(biāo)卡尺測量移植物的體積≥8mm3；切取移植物送病檢，證實(shí)是存活的異位子宮內(nèi)膜組織。


  實(shí)驗(yàn)設(shè)計舉例

     

動物處死后開腹探查異位灶面積，形態(tài)，位置，有無粘連等
取異位灶進(jìn)行HE染色，觀察子宮內(nèi)膜腺體和間質(zhì)。

         
                 HE染色

        

數(shù)據(jù)來源：Mert Ilhan，Zulfiqar Ali，Ikhlas A. Khan，Hakk? Tas? tan，Esra Küpeli Akkol，The regression of endometriosis with glycosylated flavonoids isolated from Melilotus officinalis (L.) Pall. in an endometriosis rat model，Taiwanese Journal of Obstetrics & Gynecology 59 (2020) 211e219.

數(shù)據(jù)來源：Rosalba Siracusa，Ramona D’Amico，Daniela Impellizzeri，Marika Cordaro，etc，Autophagy and Mitophagy Promotion in a Rat Model of Endometriosis，Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 5074.

數(shù)據(jù)來源：Wenliang Su， Huan Cui，Danning Wu，Jiawen Yu， Lulu Ma，etc. Suppression of TLR4-MyD88 signaling pathway attenuated chronic mechanical pain in a rat model of endometriosis， Su et al. Journal of Neuroinflammation (2021) 18:65.

根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求，還可以把內(nèi)膜移植到所需位置，如卵巢包膜輸卵管、子宮系膜、腸系膜及腹壁的各部、腓腸肌等。