近年來,小型豬(minipig)在生物醫學研究領域的應用快速增長,且遺傳修飾豬模型用于糖尿病研究和其他轉化醫學領域研究發展迅猛。單純高脂飲食可在豬中誘發肥胖和糖耐量異常等表型,但一般不會導致糖尿病,需要聯合應用其他手段破壞胰島β細胞,比如鏈唑霉素、四氧嘧啶和基因修飾技術等。為便于小型豬在糖尿病研究領域的推廣和應用,靈賦拓普結合自身在動物科研多年從業經驗,分享此篇小型豬糖尿病模型。
由于豬沒有自發的糖尿病,必須通過外科手術或化學藥物來誘發1型糖尿病。STZ對胰島β細胞具有選擇性毒性作用,對動物機體組織的毒性相對較小,動物存活率高,是目前廣泛采用的制備動物糖尿病模型的藥物。
小型豬糖尿病模型
一、實驗材料: (1)實驗動物:巴馬小型豬,18-22kg,雄性,6只; (2)實驗材料:鏈脲佐菌素( streptozotocin,STZ),血糖儀及試紙,胰島素試劑盒,舒泰50; (3)客戶需求:靈賦拓普提供飼養場地及采購動物,完成巴馬豬1型糖尿病模型建立,安樂死及大體解剖尸體處理。 二、實驗方法: 糖尿病模型建立 (1)造模方式 6只巴馬小型豬采購接收后,進行檢疫飼養,實驗日期確定后,提前24小時禁食,造模當天隨機抽取3只小型豬進行誘導麻醉,建立耳靜脈通道,將STZ配制成50ml溶液按照150mg/KG體重劑量4min靜脈注射進入巴馬小型豬體內。 在應用 STZ 后 6 h 喂飼高糖飼料,1 kg飼料添加 400 ~ 500 g 蔗糖,避免一過性低血糖引起并發癥。 另外3只小型豬做為對照組,注射等量生理鹽水,正常檢測血糖及開展后續體重及糖耐實驗。 (2)空腹血糖檢測 STZ給藥后,分別于0h,2h,4h,6h,8h,10h,12h,14h,16h,18h,20h,22h,24h檢測血糖含量。 STZ給藥后,分別進行每周兩次血糖測試,每次間隔3-4天(初步定在周二,周五),連續檢測3周。測血糖前要空腹。 為確保動物存活,在血糖高于20 mmol /L時皮下注射胰島素 12U,高于 25 mmol /L時注射 20 U。 (3)口服糖耐測試 STZ給藥后3周,進行糖耐量測試,空腹口服溶于80-100ml水內的無水葡萄糖粉25g,5分鐘內喝完,從口服第一口開始計算,于口服前0h,口服后0.5h,1h,2h采血測試血糖含量。測試過程中,盡量避免動物過激掙扎。 (4)體重檢測 STZ給藥后,分別進行每周兩次體重稱量,每次間隔3-4天(初步定在周二,周五),連續檢測3周。(先稱重在測每周血糖) 糖尿病模型驗證 當實驗組與對照組給藥后血糖和糖耐量實驗有顯著性差異,血糖穩定在17mmol/L以上,且體重明顯下降,則提示模型成功。 本期分享就到這啦,更多大小動物糖尿病模型以及動物科研相關知識歡迎致電 0755-86325431. 靈賦拓普生物竭誠為您服務。