細胞劃痕實驗

當細胞長成近100%密度單層狀態(tài)時，在該單層細胞上人為劃出空白區(qū)域--劃痕，在所劃出痕跡邊緣的細胞會逐漸進入到劃出的空白區(qū)域，使痕跡愈合。

我們?yōu)槭裁匆黾毎麆澓蹖嶒灒?/span>

細胞劃痕實驗優(yōu)點包括：

1.它一定程度上模擬了細胞在體內(nèi)的遷移；

2.適合研究細胞與細胞，細胞與胞外基質之間因為相互作用而導致的細胞遷移；

3.重要的是該實驗簡單，價格便宜！

細胞劃痕實驗常用材料

6孔板、marker筆、直尺、100ul黃槍頭、PBS、基礎培養(yǎng)基等

細胞劃痕步驟：

1.畫線：用marker筆在6孔板背后，用直尺比著均勻畫線，每隔0.5-1cm畫一條線，橫穿過整排孔。每孔穿過4-5條線。
2.鋪細胞：在6孔板孔中加入約50萬個細胞（每種細胞有所差異，保證過夜能長到100%）。
3.劃痕：第二天，細胞長滿后，用100ul黃槍頭垂至背后的橫線在孔中劃痕。
4.清洗：用PBS清洗細胞3次，以洗掉劃下的細胞，加入無血清的基礎培養(yǎng)基（此時可以加入藥物，以研究該藥物對細胞遷移的影響）。
5.拍照：放入細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。根據(jù)實驗需要在不同時間點拍照。

6.分析：可用Image J軟件對傷口閉合度進行評估

    
              0h                              24h

細胞劃痕實驗注意事項：

1.細胞劃痕實驗選擇細胞時尤其適用于具有遷移能力的上皮細胞，避免選擇生長緩慢、貼壁不牢、長不滿或堆積生長的細胞，如巨噬細胞等。

2.在劃痕前細胞要鋪滿，但不能長得又太密，否則可能在劃痕時成片滑落。

3.一般使用無血清的基礎培養(yǎng)基培養(yǎng)，如果培養(yǎng)時間久或者無血清對細胞影響嚴重，可以用1%血清，但血清濃度最大一般不超過2%。

4.拍照時，每個時間點拍照的位置要一致，要拍同一個地方，否則結果無法分析。

更多信息，請咨詢拓普生物！