自2013年美國科學家詹姆斯·羅思曼、蘭迪·謝克曼及德國科學家托馬斯·祖德霍夫因發現細胞的囊泡運輸調控獲得諾貝爾生理學或醫學獎，Exosome研究晉升為科研熱點，熱度不斷攀升，2020 年Exosome相關課題就中標兩千余項。下面我們就來聊聊Exosome，干貨來了，小伙伴們，接住！

圖注：外泌體相關研究近年走勢圖

首先我們了解下Exosome的相關背景知識：

1什么是Exosome

Exosome（外泌體）是指包含了復雜 RNA（如mRNA、microRNA） 和蛋白質的小膜泡 (30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡，廣泛存在于血液、尿液、母乳和細胞培養基等生物體液中。

作為細胞間通訊及物質傳遞的重要載體，Exosome能調控靶細胞內多種信號通路，并根據來源母細胞類型及攜帶的蛋白質、不同種類的RNA等組分的差異發揮不同的生物學功能。Exosome與腫瘤轉移、細胞通訊、免疫調節、細胞凋亡和自噬、細胞分化、組織再生與修復等密切相關。

Exosome來源：細胞培養液上清、菌液、血清/血漿、尿液、組織樣本，盆腔沖洗液、腫瘤囊腫積液、關節沖洗液等。

2Exosome提取

超速離心法是Exosome提取最常用的方法，這種方法硬性條件就是需要有冷凍超速離心機，得到的Exosome量比較多，但是純度往往不足，電鏡時發現Exosome聚集成塊，難以判定究竟是微囊泡還是Exosome。

試劑盒提取Exosome操作簡單，獲取的Exosome純度與提取效率相對較高，因而受到大多數人的歡迎，尤其適合樣本量不大的小伙伴。

為了讓廣大科研小伙伴們可以更順利進展實驗，拓普生物推出針對不同樣本的提取試劑盒，滿足不同科研需求，歡迎大家選購！

3Exosome鑒定

Exosome提取是第一步，之后需要鑒定，一般為三部曲:

01NTA粒徑分析

第一步，NTA粒徑分析，納米顆粒跟蹤分析（Nanoparticle TrackingAnalysis,NTA），是對每個顆粒的布朗運動進行追蹤，可檢測10nm-1000nm范圍內的顆粒。

02透射電鏡分析

第二步，透射電鏡分析，分辨率可達0.1-0.2nm，是Exosome雙層囊膜超微結構觀測的經典方法。

03標志物鑒定

第三步，標志物鑒定，根據Exosome母細胞來源，優選Exosome標志物抗體，如CD9，CD63，CD81等，通過細胞流式檢測以及Western blot檢測做進一步鑒定。

04Exosome分析是關鍵

眾所周知，Exosome攜帶mRNA、miRNA和蛋白質，這些活性物質一旦進入其它細胞，很有可能引起其它細胞功能上的變化。通過高通量測序RNA，可以篩選具有代表性的差異表達的miRNA，做蛋白組學分析，可以研究發現新的蛋白標簽。

鎖定目標分子，探究機制，一般是通過細胞實驗研究其與某種信號通路相關因子的作用關系，然后再在動物體內實驗進一步驗證。

05臨床研究

通過檢測對應疾病患者樣本中目標分子的表達水平與疾病關系，整理和分析臨床病理特征信息，進一步篩選出如具有潛在早期篩查疾病的Exosome標志物等。

總而言之，Exosome研究離不開以下幾步：

1、Exosome提取；

2、Exosome鑒定；

3、Exosome功能研究；

4、Exosome攜帶的分子功能研究；

5、Exosome分子水平的動物實驗；

6、臨床相關性研究。

目前，Exosome研究已經滲透到生物醫學的各個細分領域，比如跟火熱的干細胞強強聯合，在研究各類疾病模型的治療作用方面；比如研究植物如姜，金銀花提取的Exosome對消化系統及新冠病毒的療效作用等，毫無疑問，可以占據科研熱點的C位了。

想要做Exosome研究的小伙伴們，趕緊來聯系拓普生物吧~

深圳市拓普生物擁有分子、細胞、蛋白、動物、病理等實驗平臺，可提供Exosome研究技術一站式專業服務，助力科研實驗超速前進~~